标准类别： GB-国家标准
关键词： 肥料、尿素态氮、含量、测定、尿素酶
标准号： GB 3598—83
标准名称： 肥料中尿素态氮含量的测定尿素酶去*
标准分类： 农业土壤化肥标准
颁布部门：
颁布日期：
实施日期：

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1 适用范围
本标准适用于尿素酶法测定尿素或仅含有氮的肥料中尿素态氮含量。该法也适用于相应的工业产品。
2 原理
在一定酸度的溶液中，用尿素酶将尿素态氮转化为氨，再用硫酸标准溶液滴定。反应式如下：

CO（NH2）2+2H2O 尿素酶 （NH4）2CO3
（NH4）2CO3+H2SO4=（NH4）2SO4+CO2+H2O

3 试剂和溶液
3.1 溴甲酚绿（HG3—1220—79）：0.1%乙醇溶液。
3.2 甲基橙（HGB3089—59）：0.1溶液。
3.3 95%乙醇（GB679—80）。
3.4 混合指示剂溶液：6份0.1%溴甲酚绿溶液（3.1）和1份0.1%甲基橙溶液（3.2）混合。
3.5 硫酸（GB625—77）。
3.6 0.5N硫酸标准溶液：按照 GB601—77《化学试剂标准溶液制备方法》配制和标定。
3.7 尿素酶：新鲜的 1%溶液（悬浮液）。
4 仪器
4.1 pH计。
4.2 水浴。
5 测定手续
5.1 试液制备
称取5克试样，称准至0.0002克，置于烧怀中，加水溶解后，移入500毫升容量瓶中，稀释至刻度，混匀。
5.2 滴定
吸取V毫升（含相当0.20-0.25克尿素）的试液，移入烧杯中，稀释至100毫升，用0.5N硫酸标准溶液（3.6）滴定至pH为4.2［用 pH计（4.1）测量］；或加入 4滴混合指示剂溶液（3.4），用 0.5N硫酸标准溶液（3.6）滴定至溶液呈灰绿色（pH为 4.2）为终点，记录所需用量。
另吸取 V毫升试液，移入250毫升带磨口塞的锥形瓶中，稀释至100毫升，加入加上述滴定所需体积的0.5N硫酸标准溶液（3.6），再加入25毫升 1%尿素酶溶液（3.7），塞紧瓶塞，用力振荡2分钟，在 25±2℃下静置1小时〔或在40±2℃水浴（4.2）下静置30分钟，冷却至室温〕，用水冲洗瓶塞和瓶壁，然后用0.5N硫酸标准溶液（3.6）滴定，开始时快速加入15毫升，再继续滴定至近 pH4.2，将溶液定量地称入烧杯中（溶液总体积不大于200毫升），在pH计（4.1）上，再滴定至pH4.2为终点；或在快速加入15毫升0.5N硫酸标准溶液（3.6）后，再加入4滴混合指示剂溶液（3.4），继续滴定至溶液呈灰绿色（pH为4.2）为终点。
5.3 空白试验
按上述手续进行空白试验。
6 结果的表示
6.1 计算
6.1.1 尿素态氮含量百分数（以干基计）按下式计算：
N（ V1-V2）×0.01401 N（V1-V2）×500×140.1
×100=
100-X V G×V（100-X）
G× ×
100 500

式中：N———硫酸标准溶液的当量浓度；
V1———滴定试样用去硫酸标准溶液的体积，毫升；
V2———空白试验用去硫酸标准溶液的体积，毫升；
V———吸取试液的体积，毫升；
G———试样的质量，克；
X———试样水分含量百分数；
0.01401———每毫克当量氮的质量，克。

6.2 允许误差
6.2.1 取平行测定结果的算术平均值为测定结果。
6.2.2 平行测定结果的绝对差值不大于0.10%。
6.2.3 不同实验室测定结果的绝对差值不大于0.15%。


附 录 A
本标准一般说明
（补充件）
A.1 标准中使用的计量仪器，如天平、砝码、容量瓶、滴定管、移液管等应校正后使用。
A.2 标准中使用的水，除特别说明外，均用蒸馏水或去离子水。
A.3 标准中使用的试剂，除特别注明外，均为化学纯以上试剂。
A.4 标准中所用酸或氨水液体试剂，只写试剂名称时，系指该试剂标准规定浓度的试剂（即浓酸或浓氨水）。例如硫酸系指95-98%硫酸，氨水系指25-28%氨水。
A.5 标准中用液体试剂配制的水溶液，以试剂的体积加水的体积表示时，例如1+3硫酸，系指1体积硫酸和3体积水配成。
A.6 标准中用固体试剂配制的百分浓度溶液，系指100毫升溶液中含有溶质的克数。
A.7 标准中测定手续项中所提及的仪器或试剂和溶液，均使用仪器或试剂和溶液项中所规定的规格。
A.8 空白试验，除不加试样外，操作手续、应用试剂和试剂用量均与测定时间相同。